Detección de betalactamasas de espectro extendido en cepas de la familia enterobacteriaceae / Extended spectrum betalactamase detection in enterobacteriaceae family strains

La alta incidencia de las enfermedades infecciosas y el surgimiento de enterobacterias resistentes a los antibióticos representan un gran problema actualmente, siendo las cepas productoras de Betalactamasas de Espectro Extendido (BLEE) un ejemplo de este fenómeno. A fin de determinar la producción de BLEE en cepas pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae aisladas en el Centro de Referencia Bacteriológica del Servicio Autónomo del Hospital Universitario de Maracaibo, durante el periodo enero 2006-diciembre 2007, se analizaron 3883 enterobacterias distribuidas en 14 especies diferentes. Para la detección de BLEE se utilizó como método preliminar el de Kirby-Baüer, siguiendo los lineamientos del CLSI; adicionalmente se utilizaron pruebas confirmatorias como sinergia del doble disco, el método del disco combinado y el método de E-Test ESBL. Del total de enterobacterias estudiadas 951 (24,49 por ciento) fueron productoras de BLEE. K. oxytoca (43,33 por ciento), K. pneumoniae (40,10 por ciento), y Enterobacter cloacae (31,54 por ciento), fueron los microorganismos con mayor producción de BLEE. Al correlacionar la producción de BLEE con el servicio de atención del paciente, se encontró asociación estadísticamente significativa (p<0,05) entre la producción de BLEE y las UCI. Estos resultados reflejan el uso excesivo de antibióticos, lo que trae como consecuencia la aparición y diseminación de la resistencia

The high incidence of infectious diseases and the rise of antibiotic-resistant enterobacteria represent a great medical problem today, and the Extended Spectrum Betalactamase (ESBL)-producing strains are an example of this phenomenon. In order to determine the production of ESBL in strains pertaining to the Enterobacteria family, isolated in the Bacteriological Reference Center at Maracaibo’s University Hospital from January 2006-December 2007, 3883 strains of enterobacteria were analyzed, distributed among 14 different species. To detect ESBL, the Kirby-Baüer test was used as a preliminary method, following the CLSI guidelines; additionally, confirmatory tests such as double disc synergy, the combined disc and E-test ESBL methods were used. Of all the enterobacteria studied, 951 (24.49 percent) were ESBL producers. K. oxytoca (43.33 percent), K. pneumoniae (40.10 percent), and Enterobacter cloacae (31.54 percent) were the microorganisms with greater ESBL production. When correlating ESBL production with the patient services, a statistically significant association (p0.05) between ESBL production and the ICU was detected. These results reflect that excessive antibiotic use produces the appearance and dissemination of resistance

Fishmeal extract bile salt lactose agar--a differential medium for enteric bacteria.

Fishmeal extract bile salt lactose agar (FEBLA), a new differential medium for enteric bacteria was developed and evaluated for its ability to grow and differentiate lactose fermenters (LF) from non-lactose fermenters (NLF) in comparison with MacConkeys agar. Performance of FEBLA was at par with the latter. On FEBLA medium, the contrast between LF and NLF colonies was pronounced and Klebsiella pneumoniae produced more mucoid colonies than on MacConkeys agar (Hi Media). Unlike MacConkeys agar, a 24 h culture of K. pneumoniae cells on FEBLA were longer and thicker with abundant capsular material around the bacilli. Escherichia coli produced long and thick cells but only after 48h. No change in cell morphology was evident with regard to Salmonella typhi, S. paratyphi A, Shigella flexneri, Pseudomonas aeruginosa, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Citrobacter koseri and Acinetobacter baumannii. Performance of the medium was controlled using E. coli and S. flexneri. FEBLA is simple, cost effective and may be a suitable alternative in the preliminary identification of enteric bacteria.

Genotipificación de cepas de enterobacterias procedentes de 4 centros de salud del área de Caracas / Genotyping of enterobacterias strains from 4 healthcare centers in Caracas

Las infecciones nosocomiales pueden ser producidas por microorganismos resistentes a la acción de los antimicrobianos que han sido seleccionados por la mal uso ó el uso indiscriminado de los antibióticos en el ámbito hospitalario. En los últimos años se han desarrollado nuevas técnicas moleculares de tipificación basada en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), que han representado un avance importante en el estudio de las enfermedades infecciosas, siendo muy útiles al permitir diferenciar serotipos estrechamente relacionados y grupos de cepas no relacionadas clonalmente, debido a su gran poder discriminatorio. En Venezuela, son pocos los estudios de eepidemiología molecular de las infecciones intrahospitalarias, y por esta razón nos propusimos genotipificar cepas de Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae provenientes de aislados nosocomiales de cuatro centros de salud del área metropolitana (Hospital "Dr. José María Vargas", Hospital "Dr. Domingo Luciani", Centro Médico de Caracas y Policlínica Metropolitana) con la finalidad de determinar la relación clonal existente entre estas cepas. El uso de ERIC-PCR permitió relacionar parcialmente las especies de E. coli aisladas en los cuatro centros de salud, sin embargo la técnica de REP-PCR permitió discriminar entre los patrones de bandas similares, mostrando un poder de resolución mayor. El uso de ERIC-PCR y REP-PCR no permitió tipificar la mayoría de las cepas de K. pneumoniae aisladas en los cuatro centros de salud en estudio. En el Centro Médico de Caracas se identificaron dos aislados clonales provenientes de diferentes áreas del hospital, Unidad de Terapia de Adultos y Hospitalización. En la Policlínica Metropolitana se identificaron tres aislados clonales, dos en la unidad de Terapia y uno en Hospitalización. En el Hospital "Dr. Domingo Luciani" y en el Hospital "Dr. José María Vargas" no se identificaron clones. Estos resultados proporcionan un aporte a los programas de vigilancia...

Nosocomial infections can be produced by microorganisms resistand to antimicrobial agents, and they have been selected by the bad use or abuse of antibiotics in the hospital environment. Recently, new molecular typing techniques have been developed, based on polymerase chain reaction (PCR). These techniques represent an important advantage the study of infectious diseases; they are able to discriminate relate closed serovars and groups of nonrelated isolates due to its great power discriminatory. In Venezuela, there is a small number of molecular epidemiology researches. The goal of the present study is genotyping Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae isolated of nosocomial infected patients from four healthcare centers in the metropolitan area (Hospital "Dr. José María Vargas", Hospital "Dr. Domingo Luciani", Centro Médico de Caracas, Policlínica Metropolitana) in order to investigate the clonal relationship between the isolates. ERIC-PCR allowed us to correlate E. coli isolates however REP-PCR shows greater greater resolution. The use of both ERIC-PCR and REP-PCR, did not permit us typing K. pneumoniae isolates. Two clonally related isolates from Centro Médico de Caracas were identified. Three clonally related isolates from the Policlínica Metropolitana ere identified. No clones were identified in samples from Hospital "Dr. Domingo Luciani" and the Hospital "José María Vargas". These results contribute to monitoring programs, to improve the control of the bacterial infections, helping to establish efficient procedures and reduce nosocomials infections.

Meio para diferenciação da tribo Proteeae de outras enterobactérias / Medium for differentiating the tribe Proteeae from other enterobacteria

É proposto um novo meio diferencial para isolamento preliminar de enterobactéria. Este meio diferencia bactérias da tribo Proteeae de outras enterobactérias. Para este fim foi utilizada a associação de L-triptofato e citrato de ferro (AU)